產(chǎn)品咨詢
產(chǎn)品中文名:大鼠色氨酸羥化酶1(TPH1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
指標(biāo)別名:TPH; TPRH; TRPH; Tryptophan 5-Monooxygenase
指標(biāo)簡介:色氨酸羥化酶1(TPH1),也被稱為色氨酸羥化酶或色氨酸 5-羥化酶 1,是由TPH1基因編碼的酶。它于1988年首次被發(fā)現(xiàn)合成血清素,并且直到2003年被認(rèn)為只有一個TPH 基因,而在小鼠 、人和人腦中發(fā)現(xiàn)了第二種形式,然后將原來的TPH重新命名到 TPH1。它催化色氨酸的生物蝶呤依賴性單氧化為5-羥基色氨酸(5-HTP),隨后脫羧形成神經(jīng)遞質(zhì)血清素(5-羥色胺或5-HT)。它是血清素生物合成中的限速酶。TPH表達(dá)僅限于少數(shù)特殊組織:raphe神經(jīng)元,松果體細(xì)胞,肥大細(xì)胞,單核白細(xì)胞,朗格漢斯胰島的β細(xì)胞以及腸道和胰腺腸嗜鉻細(xì)胞。它對于在體內(nèi)和大腦中合成吲哚胺神經(jīng)遞質(zhì)和相關(guān)化合物非常重要,包括5-羥色胺,褪黑激素,色胺,N-甲基色胺和N,N-二甲基色胺。它在體內(nèi)表達(dá),但不在大腦中表達(dá)。
檢測范圍:0.31—20ng/ml
靈敏度:<0.06ng/ml
精密度:板內(nèi)變異系數(shù)均<9%,板間變異系數(shù)均<10%
保存溫度:4℃
有效期:6 個月
檢測原理:本試劑盒采用雙抗體夾心 ELISA 法。試劑盒提供的酶標(biāo)板已包被捕獲抗體,實驗時將待檢樣品(或標(biāo)準(zhǔn)品)加入酶標(biāo)板反應(yīng)孔中,捕獲抗體結(jié)合目的蛋白。加入生物素標(biāo)記檢測抗體與目的蛋白結(jié)合,再加入 SABC 與標(biāo)記抗體結(jié)合,形成捕獲抗體-目的蛋白-檢測抗體-SABC 免疫復(fù)合物,游離成分均被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB 在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色,加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長處檢測吸光度(OD),目的蛋白濃度與 OD450 值之間呈正相關(guān),通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣品中目的蛋白的濃度。
樣品的收集和保存:
1、血清:全血樣品于室溫放置 2 小時或 4℃過夜,然后 4℃,1,000×g 離心 15 分鐘,取上清即可檢測。或?qū)⑸锨逯糜凇?-20℃冷凍保存,避免反復(fù)凍融。
2、血漿:用 EDTA 或肝素鈉抗凝管采集全血樣品,采集后 30 分鐘內(nèi)置于 4℃冰箱,1,000×g 離心 15分鐘,取上清即可檢測。或取上清置于≤ -20℃冷凍保存,避免反復(fù)凍融。
3、組織勻漿:用預(yù)冷的 PBS (0.01mol/L, pH=7.4) 清洗組織,去除殘留血液,冰上切割組織后稱重。按組織重量(g): PBS 體積(ml) =1:9 的比例,加入 9 倍體積的 PBS(比如 1g 的組織樣品加入 9ml 的 PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄),加入玻璃勻漿器中,在冰上充分研磨?梢詫驖{液進(jìn)行反復(fù)凍融或超聲破碎以充分勻漿。最后將勻漿液于 4℃,3000×g 離心 15 分鐘,取上清即可檢測(如需要可取部分上清進(jìn)行 BCA 蛋白定量);蛉∩锨逯糜凇 -20℃冷凍保存,避免反復(fù)凍融。
4、細(xì)胞裂解液:貼壁細(xì)胞用預(yù)冷的 PBS 輕輕清洗,胰蛋白酶消化,1,000×g 離心 5 分鐘后收集細(xì)胞;懸浮細(xì)胞可直接離心收集。收集到的細(xì)胞用預(yù)冷的 PBS 洗滌 3 次。PBS 稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到10^6個/ml 左右。通過反復(fù)凍融或超聲破碎使細(xì)胞裂解。4℃,3,000×g 離心 15 分鐘,取上清即可檢測。或取上清置于≤ -20℃冷凍保存,避免反復(fù)凍融。
5、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其他生物體液:收集液體后于 4℃,3000×g 離心 15 分鐘,取上清即可檢測。樣本處理相關(guān)試劑推薦:PBS 緩沖液(貨號:U21-259B),0.25%胰蛋白酶-EDTA 消化液(貨號:U31-323C),0.25%胰蛋白酶消化液(貨號:U31-324C)。
咨詢熱線:400-681-8582 021-64228065
溫馨提示:本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)研究使用,不得用于其他用途!
Rat TPH1 Elisa Kit
貨號:U96-2364E
規(guī)格:96T
價格:2909 元
檢測物種: Rat
應(yīng)用范圍: 0.31—20ng/ml
產(chǎn)品類型: 檢測試劑盒
保存溫度:2-8°C
產(chǎn)地: YOBIBIO
庫存:現(xiàn)貨
Rat TPH1 Elisa Kit
貨號:U48-2364E
規(guī)格:48T
價格:2188 元
檢測物種: Rat
應(yīng)用范圍: 0.31—20ng/ml
產(chǎn)品類型: 檢測試劑盒
保存溫度:2-8°C
產(chǎn)地: YOBIBIO
庫存:現(xiàn)貨
Rat TPH1 Elisa Kit
貨號:
規(guī)格:
價格: 元
檢測物種: Rat
應(yīng)用范圍: 0.31—20ng/ml
產(chǎn)品類型: 檢測試劑盒
保存溫度:2-8°C
產(chǎn)地: YOBIBIO
庫存:
Rat TPH1 Elisa Kit
貨號:
規(guī)格:
價格: 元
檢測物種: Rat
應(yīng)用范圍: 0.31—20ng/ml
產(chǎn)品類型: 檢測試劑盒
保存溫度:2-8°C
產(chǎn)地: YOBIBIO
庫存:
Rat TPH1 Elisa Kit
貨號:
規(guī)格:
價格: 元
檢測物種: Rat
應(yīng)用范圍: 0.31—20ng/ml
產(chǎn)品類型: 檢測試劑盒
保存溫度:2-8°C
產(chǎn)地: YOBIBIO
庫存: