產(chǎn)品咨詢
產(chǎn)品中文名:大鼠環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷(cGMP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
指標(biāo)別名:Cyclic Guanosine Monophosphate;c-GMP; 3',5'-Cyclic GMP; Cyclic 3',5'-GMP; Guanosine 3',5'-Cyclic Phosphate
指標(biāo)簡(jiǎn)介:環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷(cGMP)是一種環(huán)狀核苷酸,來(lái)源于三磷酸鳥(niǎo)苷(GTP)。它最可能的作用機(jī)制是激活細(xì)胞內(nèi)的蛋白激酶,以應(yīng)對(duì)膜滲透性肽類激素與細(xì)胞外表面的結(jié)合。鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶(GC)催化 cGMP 的合成。這種酶將 GTP 轉(zhuǎn)換為 cGMP。肽類激素,如心房鈉尿素激活膜結(jié)合的 GC,而可溶性 GC( sGC ) 通常被一氧化氮激活以刺激 cGMP 的合成。sGC 可被 ODQ(1H-[1,2,4]噁二唑并[4,3-a]喹喔啉-1-酮)抑制。cGMP 是離子通道傳導(dǎo)性、糖原分解和細(xì)胞凋亡的常見(jiàn)調(diào)節(jié)劑。它還能放松平滑肌組織。在血管中,血管平滑肌的放松導(dǎo)致血管擴(kuò)張和血流量增加。cGMP 是眼睛中光傳導(dǎo)的二級(jí)信使。在哺乳動(dòng)物眼睛的光感受器中,光的存在激活了磷酸二酯酶,使 cGMP 降解。光感受器中的鈉離子通道是 cGMP 門(mén)控的,因此 cGMP 的降解導(dǎo)致鈉離子通道關(guān)閉,從而導(dǎo)致光感受器質(zhì)膜的超極化,最終導(dǎo)致視覺(jué)信息被傳送到大腦。cGMP 還被視為介導(dǎo)了皮質(zhì)第五層錐體細(xì)胞頂端樹(shù)突對(duì)semaphorin-3A(Sema3a)的吸引力的開(kāi)啟。這種吸引是由存在于頂端樹(shù)突中的可溶性鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶(SGC)水平增加所介導(dǎo)的。SGC 產(chǎn)生 cGMP, 導(dǎo)致一連串的化學(xué)激活,從而導(dǎo)致對(duì) Sema3a 的吸引。軸突中沒(méi)有 SGC 會(huì)導(dǎo)致 Sema3a 的排斥。這一策略確保了錐體神經(jīng)元的結(jié)構(gòu)極化,并發(fā)生在胚胎發(fā)育期。cGMP 和 cAMP 一樣,在嗅覺(jué)受體接受氣味輸入時(shí)被合成。cGMP 產(chǎn)生緩慢,比 cAMP 具有更持久的生命力,這使它與細(xì)胞對(duì)氣味刺激的長(zhǎng)期反應(yīng)有關(guān),如長(zhǎng)期癡呆。
檢測(cè)范圍:1.56–100pmol/ml
靈敏度:<0.28pmol/ml
精密度:板內(nèi)變異系數(shù)均<9%,板間變異系數(shù)均<10%
保存溫度:4℃
有效期:6 個(gè)月
檢測(cè)原理:本試劑盒采用雙抗體夾心 ELISA 法。試劑盒提供的酶標(biāo)板已包被捕獲抗體,實(shí)驗(yàn)時(shí)將待檢樣品(或標(biāo)準(zhǔn)品)加入酶標(biāo)板反應(yīng)孔中,捕獲抗體結(jié)合目的蛋白。加入生物素標(biāo)記檢測(cè)抗體與目的蛋白結(jié)合,再加入 SABC 與標(biāo)記抗體結(jié)合,形成捕獲抗體-目的蛋白-檢測(cè)抗體-SABC 免疫復(fù)合物,游離成分均被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB 在辣根過(guò)氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色,加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)吸光度(OD),目的蛋白濃度與 OD450 值之間呈正相關(guān),通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中目的蛋白的濃度。
樣品的收集和保存:
1、血清:全血樣品于室溫放置 2 小時(shí)或 4℃過(guò)夜,然后 4℃,1,000×g 離心 15 分鐘,取上清即可檢測(cè);?qū)⑸锨逯糜凇?-20℃冷凍保存,避免反復(fù)凍融。
2、血漿:用 EDTA 或肝素鈉抗凝管采集全血樣品,采集后 30 分鐘內(nèi)置于 4℃冰箱,1,000×g 離心 15分鐘,取上清即可檢測(cè);蛉∩锨逯糜凇 -20℃冷凍保存,避免反復(fù)凍融。
3、組織勻漿:用預(yù)冷的 PBS (0.01mol/L, pH=7.4) 清洗組織,去除殘留血液,冰上切割組織后稱重。按組織重量(g): PBS 體積(ml) =1:9 的比例,加入 9 倍體積的 PBS(比如 1g 的組織樣品加入 9ml 的 PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄),加入玻璃勻漿器中,在冰上充分研磨?梢詫(duì)勻漿液進(jìn)行反復(fù)凍融或超聲破碎以充分勻漿。最后將勻漿液于 4℃,3000×g 離心 15 分鐘,取上清即可檢測(cè)(如需要可取部分上清進(jìn)行 BCA 蛋白定量);蛉∩锨逯糜凇 -20℃冷凍保存,避免反復(fù)凍融。
4、細(xì)胞裂解液:貼壁細(xì)胞用預(yù)冷的 PBS 輕輕清洗,胰蛋白酶消化,1,000×g 離心 5 分鐘后收集細(xì)胞;懸浮細(xì)胞可直接離心收集。收集到的細(xì)胞用預(yù)冷的 PBS 洗滌 3 次。PBS 稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到10^6個(gè)/ml 左右。通過(guò)反復(fù)凍融或超聲破碎使細(xì)胞裂解。4℃,3,000×g 離心 15 分鐘,取上清即可檢測(cè);蛉∩锨逯糜凇 -20℃冷凍保存,避免反復(fù)凍融。
5、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其他生物體液:收集液體后于 4℃,3000×g 離心 15 分鐘,取上清即可檢測(cè)。樣本處理相關(guān)試劑推薦:PBS 緩沖液(貨號(hào):U21-259B),0.25%胰蛋白酶-EDTA 消化液(貨號(hào):U31-323C),0.25%胰蛋白酶消化液(貨號(hào):U31-324C)。
咨詢熱線:400-681-8582 021-64228065
溫馨提示:本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)研究使用,不得用于其他用途!
Rat cGMP Elisa Kit
貨號(hào):U96-1713E
規(guī)格:96T
價(jià)格:2909 元
檢測(cè)物種: Rat
應(yīng)用范圍: 1.56–100pmol/ml
產(chǎn)品類型: 檢測(cè)試劑盒
保存溫度:2-8°C
產(chǎn)地: YOBIBIO
庫(kù)存:現(xiàn)貨
Rat cGMP Elisa Kit
貨號(hào):U48-1713E
規(guī)格:48T
價(jià)格:2188 元
檢測(cè)物種: Rat
應(yīng)用范圍: 1.56–100pmol/ml
產(chǎn)品類型: 檢測(cè)試劑盒
保存溫度:2-8°C
產(chǎn)地: YOBIBIO
庫(kù)存:現(xiàn)貨
Rat cGMP Elisa Kit
貨號(hào):
規(guī)格:
價(jià)格: 元
檢測(cè)物種: Rat
應(yīng)用范圍: 1.56–100pmol/ml
產(chǎn)品類型: 檢測(cè)試劑盒
保存溫度:2-8°C
產(chǎn)地: YOBIBIO
庫(kù)存:
Rat cGMP Elisa Kit
貨號(hào):
規(guī)格:
價(jià)格: 元
檢測(cè)物種: Rat
應(yīng)用范圍: 1.56–100pmol/ml
產(chǎn)品類型: 檢測(cè)試劑盒
保存溫度:2-8°C
產(chǎn)地: YOBIBIO
庫(kù)存:
Rat cGMP Elisa Kit
貨號(hào):
規(guī)格:
價(jià)格: 元
檢測(cè)物種: Rat
應(yīng)用范圍: 1.56–100pmol/ml
產(chǎn)品類型: 檢測(cè)試劑盒
保存溫度:2-8°C
產(chǎn)地: YOBIBIO
庫(kù)存: