產(chǎn)品咨詢(xún)
產(chǎn)品中文名:小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
指標(biāo)別名:IBP3;BP-53;IBP-3;IGFBP-3;BP53;IBP3;Growth Hormone-Dependent Binding Protein;Acid Stable Subunit Of The 140 K IGF Complex
指標(biāo)簡(jiǎn)介:胰島素樣生長(zhǎng)因子(IGF)結(jié)合蛋白-3(IGFBP-3)是循環(huán)中IGF水平的主要決定因素,在臨床評(píng)估生長(zhǎng)激素(GH)缺乏癥及預(yù)測(cè)GH治療反應(yīng)方面具有重要作用。IGFBP-3的循環(huán)水平與多種常見(jiàn)癌癥的風(fēng)險(xiǎn)呈負(fù)相關(guān),而抗增殖藥物(如抗雌激素和維甲酸)的部分作用機(jī)制是通過(guò)上調(diào)IGFBP-3基因的表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。IGFBP-3作為IGF的載體,已被證實(shí)具有獨(dú)立于IGF結(jié)合的生物活性。在未分化和早期分化的軟骨細(xì)胞中,IGFBP-3具有抗增殖作用,但在終末分化的軟骨細(xì)胞中則沒(méi)有這種作用。IGFBP-3對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制或促進(jìn)效應(yīng)與其是否結(jié)合IGF無(wú)關(guān),這些效應(yīng)通過(guò)位于細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核或細(xì)胞外基質(zhì)中的特異性IGFBP-3結(jié)合蛋白/受體介導(dǎo)。此外,IGFBP-3還存在于7號(hào)染色體上。本試劑盒中使用的產(chǎn)品為重組人IGFBP-3,由265個(gè)氨基酸組成,分子量為29 kDa;由于糖基化作用,其實(shí)際分子量為41 kDa。
檢測(cè)范圍:156–10000pg/ml
靈敏度:<28.36pg/ml
精密度:板內(nèi)變異系數(shù)均<9%,板間變異系數(shù)均<10%
保存溫度:4℃
有效期:6 個(gè)月
檢測(cè)原理:本試劑盒采用雙抗體夾心 ELISA 法。試劑盒提供的酶標(biāo)板已包被捕獲抗體,實(shí)驗(yàn)時(shí)將待檢樣品(或標(biāo)準(zhǔn)品)加入酶標(biāo)板反應(yīng)孔中,捕獲抗體結(jié)合目的蛋白。加入生物素標(biāo)記檢測(cè)抗體與目的蛋白結(jié)合,再加入 SABC 與標(biāo)記抗體結(jié)合,形成捕獲抗體-目的蛋白-檢測(cè)抗體-SABC 免疫復(fù)合物,游離成分均被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB 在辣根過(guò)氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色,加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)吸光度(OD),目的蛋白濃度與 OD450 值之間呈正相關(guān),通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中目的蛋白的濃度。
樣品的收集和保存:
1、血清:全血樣品于室溫放置 2 小時(shí)或 4℃過(guò)夜,然后 4℃,1,000×g 離心 15 分鐘,取上清即可檢測(cè);?qū)⑸锨逯糜凇?-20℃冷凍保存,避免反復(fù)凍融。
2、血漿:用 EDTA 或肝素鈉抗凝管采集全血樣品,采集后 30 分鐘內(nèi)置于 4℃冰箱,1,000×g 離心 15分鐘,取上清即可檢測(cè);蛉∩锨逯糜凇 -20℃冷凍保存,避免反復(fù)凍融。
3、組織勻漿:用預(yù)冷的 PBS (0.01mol/L, pH=7.4) 清洗組織,去除殘留血液,冰上切割組織后稱(chēng)重。按組織重量(g): PBS 體積(ml) =1:9 的比例,加入 9 倍體積的 PBS(比如 1g 的組織樣品加入 9ml 的 PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄),加入玻璃勻漿器中,在冰上充分研磨?梢詫(duì)勻漿液進(jìn)行反復(fù)凍融或超聲破碎以充分勻漿。最后將勻漿液于 4℃,3000×g 離心 15 分鐘,取上清即可檢測(cè)(如需要可取部分上清進(jìn)行 BCA 蛋白定量);蛉∩锨逯糜凇 -20℃冷凍保存,避免反復(fù)凍融。
4、細(xì)胞裂解液:貼壁細(xì)胞用預(yù)冷的 PBS 輕輕清洗,胰蛋白酶消化,1,000×g 離心 5 分鐘后收集細(xì)胞;懸浮細(xì)胞可直接離心收集。收集到的細(xì)胞用預(yù)冷的 PBS 洗滌 3 次。PBS 稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到10^6個(gè)/ml 左右。通過(guò)反復(fù)凍融或超聲破碎使細(xì)胞裂解。4℃,3,000×g 離心 15 分鐘,取上清即可檢測(cè)。或取上清置于≤ -20℃冷凍保存,避免反復(fù)凍融。
5、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其他生物體液:收集液體后于 4℃,3000×g 離心 15 分鐘,取上清即可檢測(cè)。樣本處理相關(guān)試劑推薦:PBS 緩沖液(貨號(hào):U21-259B),0.25%胰蛋白酶-EDTA 消化液(貨號(hào):U31-323C),0.25%胰蛋白酶消化液(貨號(hào):U31-324C)。
咨詢(xún)熱線:400-681-8582 021-64228065
溫馨提示:本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)研究使用,不得用于其他用途!
Mouse IGFBP3 ELISA Kit
貨號(hào):U96-1487E
規(guī)格:96T
價(jià)格:2909 元
檢測(cè)物種: Mouse
應(yīng)用范圍: 156→10000pg/ml
產(chǎn)品類(lèi)型: 檢測(cè)試劑盒
保存溫度:2-8℃
產(chǎn)地: YOBIBIO
庫(kù)存:現(xiàn)貨
Mouse IGFBP3 ELISA Kit
貨號(hào):U48-1487E
規(guī)格:48T
價(jià)格:2188 元
檢測(cè)物種: Mouse
應(yīng)用范圍: 156→10000pg/ml
產(chǎn)品類(lèi)型: 檢測(cè)試劑盒
保存溫度:2-8℃
產(chǎn)地: YOBIBIO
庫(kù)存:現(xiàn)貨
Mouse IGFBP3 ELISA Kit
貨號(hào):
規(guī)格:
價(jià)格: 元
檢測(cè)物種: Mouse
應(yīng)用范圍: 156→10000pg/ml
產(chǎn)品類(lèi)型: 檢測(cè)試劑盒
保存溫度:2-8℃
產(chǎn)地: YOBIBIO
庫(kù)存:
Mouse IGFBP3 ELISA Kit
貨號(hào):
規(guī)格:
價(jià)格: 元
檢測(cè)物種: Mouse
應(yīng)用范圍: 156→10000pg/ml
產(chǎn)品類(lèi)型: 檢測(cè)試劑盒
保存溫度:2-8℃
產(chǎn)地: YOBIBIO
庫(kù)存:
Mouse IGFBP3 ELISA Kit
貨號(hào):
規(guī)格:
價(jià)格: 元
檢測(cè)物種: Mouse
應(yīng)用范圍: 156→10000pg/ml
產(chǎn)品類(lèi)型: 檢測(cè)試劑盒
保存溫度:2-8℃
產(chǎn)地: YOBIBIO
庫(kù)存: